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在今年的CNAS扩项中,有一项是关于香港中成药注册技术指引(2004)-《安全性资料技术指引》,其中提到金黄色葡萄球菌控制菌检查用到了一个培养基叫甘露醇高盐琼脂培养基,这个名字引起了我的注意。在《中国药典》中,金黄色葡萄球菌的选择性培养基叫甘氯醇氯化钠琼脂培养基,为什么有高盐或是氯化钠这样的字呢?
我们常用的培养基要么不含氯化钠,要么含量不高,如含0.5%的TSB、麦液等、含0.8%的RV,pH7.0名字中虽然有氯化钠几个字,但含量在0.43%。足以见甘氯醇氯化钠琼脂培养基中含7.5%氯化钠的量确实很高。
首先什么是培养基。培养基,是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。
维持人体正常生理机能需要的六大营养素包含碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质和水。微生物也和人体一样生长繁殖需要不同类型的营养。甘氯醇氯化钠琼脂培养基中氯化钠含量非常高,待测样品中除葡萄球菌外,高浓度氯化钠抑制其它微生物的生长。牛肉提取物和多聚蛋白胨为葡萄球菌的生长提供氮源、碳源、硫源和生长因子。酚红是酸碱指示剂,酚红溶液在pH<6.8时为黄色,pH6.8~8.4时为红色,pH>8.4时则显紫红色。金黄色葡萄球菌发酵甘露醇产酸,使得菌落周围培养基显黄色。不能发酵甘露醇的葡萄球菌如表皮葡萄球菌,菌落周围培养基呈紫色或红色。非致病性的葡萄球菌生长状况受影响,菌落相对较小。
金黄色葡萄球菌耐盐的主要原因是其细胞通过信号分子调控转运蛋白,主动吸收相容性溶质来维持细胞渗透压平衡,从而在高盐环境中存活。所以甘氯醇氯化钠琼脂培养基可以作为金黄色葡萄球菌的选择性培养基。